故事發生在公元前480年，精明強悍的波斯士兵在波斯國王薛西斯一世（大衛·法拉爾 David Farrar 飾）的帶領下正來勢洶洶地朝希臘進軍，斯巴達城國王列奧尼達斯（理查德·伊甘 Richard Egan 飾）帶領三百勇士和四千聯軍鎮守最前線溫泉關。叛徒的出賣讓列奧尼達斯的軍隊成為了甕中之鱉，情急之下，列奧尼達斯命令聯軍撤退，自己帶領著三百勇士孤軍奮戰，死守溫泉關。　　面對敵方無邊無際的列隊，列奧尼達斯和他的勇士們早已經知道了此戰的結局，然而，他們并沒有膽怯，反而因為勢單力敵而燃起了格外高漲的氣勢。經過兩天兩夜的殊死搏斗，波斯大軍傷亡慘重，而斯巴達三百勇士亦長眠于溫泉關之中。

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